基因的分离定律指的是在杂合子细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，在细胞进行减数分裂时会随着同源染色体的分开而分离，分别进入两个配子中，并且独立地随配子遗传给后代。
该定律有几个重要的前提条件：
1. 所研究的每一对相对性状只受一对等基因控制，而且等位基因要完全显性。
2. 不同类型的雌、雄配子都能发育良好，且受精的机会均等。
3. 所有后代都应处于比较一致的环境中，而且存活率相同。
4. 供实验的群体要大、个体数量要足够多。
在杂合子细胞中，等位基因D和d会随着同源染色体的分离而分离，最终产生两种雄配子D∶d=1∶1和两种雌配子D∶d=1∶1。这种分离使得F1代只表现出一种表型（如高茎），而在F1代自交产生的F2代中，则会观察到显性性状和隐性性状以1:3的比例出现，即高茎：矮茎=3:1。
基因的分离定律是遗传学的基本定律之一，对于理解生物的遗传规律具有重要意义。它为后续的遗传学定律，如基因的自由组合定律和基因的连锁与交换定律，奠定了基础。