切片染色程序怎么做

时间:2025-01-29 20:21:18 单机游戏

切片染色程序通常包括以下步骤:

样本取材与固定

迅速取材,避免组织细胞成分与结构改变。

选择合适的固定液(如福尔马林、酒精等),固定液需即配即用,并确保固定液充足(通常为样本体积的20-30倍)。

固定时间根据组织类型和固定液类型进行调整,固定完成后密封容器并标记。

脱水与透明

在带盖玻璃瓶中完成脱水过程,使用不同浓度的酒精逐步脱水。

脱水完成后,使用透明剂(如二甲苯、丙酮等)进行透明处理,以使支持剂(如石蜡)易于渗入。

透明过程中需盖紧瓶盖,防止水分进入,并快速更换透明剂。

透蜡与包埋

在低温下进行透蜡,确保石蜡不凝固,保持温度稳定。

透蜡完成后,将组织块包埋于石蜡中,制成蜡块。

切片与贴片

使用切片机将蜡块切成薄片,调整切片厚度。

将切好的薄片粘贴在载玻片上,进行贴片。

染色

待切片干燥后,使用适当的有机溶剂去除支持剂。

根据需要选择不同的染色剂进行染色,如常用的苏木素和伊红染色,或其他特异性染色剂。

染色时间根据细胞类型和染色剂类型进行调整。

分化与漂洗

去除多余染料,可使用分化剂(如盐酸酒精)进行分化。

用PBS漂洗多次,彻底去除残留的染料和分化剂。

复染与封片

使用复染剂(如核复染剂)复染细胞核,并进行分化、水洗和返蓝处理。

最后用封片剂(如加拿大树胶)封片,避免气泡产生。

显微镜观察

在显微镜下观察染色效果,调整显微镜参数以获得最佳观察效果。

以上步骤适用于常规的石蜡切片染色,具体操作细节可能因实验需求和组织类型而有所不同。此外,还有其他染色方法,如冰冻切片染色、非切片法等,具体步骤也有所差异。