EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein,增强型绿色荧光蛋白)和GFP(Green Fluorescent Protein,绿色荧光蛋白)是两种常用的荧光蛋白,它们在生物学研究中有着广泛的应用。以下是它们之间的主要区别:
荧光强度
GFP:在暴露于蓝光时表现出明亮的绿色荧光,但其荧光强度相对较弱。
EGFP:是GFP的工程变体,通过氨基酸突变和密码子优化,其荧光强度比GFP强6倍以上。
稳定性
GFP:在化学变性剂、极端温度等苛刻条件下稳定性较差,且在还原环境下荧光会很快熄灭。
EGFP:相较于GFP,其荧光性质更稳定,对化学变性剂和极端温度有更大的耐受力。
应用
GFP:作为一种早期的荧光蛋白,被广泛用于基因表达的报告者,但其较低的荧光强度在某些应用中可能不够理想。
EGFP:由于其更高的荧光强度和稳定性,被更广泛地用作报告基因,特别是在需要高灵敏度和稳定性的实验中,如基因表达调控、细胞分化及蛋白质定位和转运等研究。
物理特性
GFP:分子量约为27kDa,由238个氨基酸组成,激发波长在490nm左右,发射波长在520nm左右。
EGFP:分子量也为27kDa,由相同的238个氨基酸组成,但其激发波长和发射波长与GFP相似,通常也在490nm左右激发,520nm左右发射。
建议
在具体实验中,选择GFP还是EGFP应根据实验需求和条件来决定。如果对荧光强度有较高要求,或者需要在苛刻条件下进行实验,EGFP是更好的选择。如果对实验条件要求不高,或者需要与其他蛋白融合表达,GFP也是一个可靠的选择。