HE染色,也称为苏木精-伊红染色法,是一种在组织学和病理学中广泛应用的染色技术。以下是HE染色的基本步骤和注意事项:
HE染色步骤
脱蜡
将切片放入二甲苯中脱蜡,通常需要15分钟。
之后,依次通过无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇和70%乙醇进行水化。
染色
将切片浸入苏木精染液中染色,时间约为10-15分钟。
用流水冲洗以去除多余的染液。
使用分化液(通常是1%盐酸乙醇)进行分化,使细胞结构更清晰,时间约为30秒至1分钟。
再次用水冲洗。
将切片浸入伊红染液中染色,时间约为1-3分钟。
脱水透明
通过80%乙醇、95%乙醇和无水乙醇进行脱水。
最后,将切片放入二甲苯中透明,通常两次,每次约5分钟。
封固
使用中性树胶进行封固。
注意事项
确保脱蜡和水化步骤彻底,否则切片在镜下观察时会模糊不清。
苏木精液使用一段时间后需更换,以保持染色效果。
分化步骤要准确,以确保细胞核和细胞质的清晰度。
伊红染色不宜过深,以免影响细胞核的观察。
染色后的切片应妥善保存,避免日光照射,以防褪色。
染色结果
细胞核呈现蓝色。
胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞等呈现不同程度的红色。
HE染色是组织学和病理学中不可或缺的技术,它帮助研究者观察细胞和组织的形态结构