高效液相色谱（HPLC）是一种广泛用于化学和生化分析的仪器，其基本原理是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的不同分配行为来实现分离。具体来说，HPLC的工作原理包括以下几个步骤：
样品引入：
样品溶液通过进样器进入流动相中，随流动相一起进入色谱柱。
色谱柱分离：
在色谱柱中，样品中的各组分与固定相发生作用（如吸附、分配、排阻、亲和等），由于各组分与固定相的作用力不同，导致它们在固定相中的滞留时间不同。
分离过程：
各组分在固定相和流动相之间反复多次进行“吸附-解吸”的分配过程，由于各组分的分配系数不同，它们在移动速度上产生较大差异，从而实现分离。
检测与记录：
分离后的各组分依次从色谱柱中流出，通过检测器将样品浓度转换成电信号，并传送到记录仪，最终数据以图谱形式输出。
HPLC的分离原理主要依赖于不同物质在移动相与固定相中的各种特性，如溶解度、吸附性、离子交换性、分子大小等。根据分离机制的不同，HPLC可以分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法及分子排阻色谱法等多种类型。
高效液相色谱仪（HPLC）通常由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。其特点是采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有颗粒极细的高效固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中，特别适用于分析高沸点不易挥发、受热不稳定的和分子量大的有机化合物。