PCR（聚合酶链反应）扩增程序通常包括以下几个步骤：
预变性
将反应混合物加热至94-98°C，以激活DNA聚合酶。这个步骤的时间取决于所使用的聚合酶。预变性的目的是使DNA模板充分变性，变成单链状态，以便后续的引物能够与之结合。
变性
将反应混合物加热至94-98°C，并保持20-30秒，以破坏两条链之间的氢键并生成单链DNA分子。这个步骤是PCR循环中必不可少的一部分。
退火
将温度降至55-60°C（具体温度根据引物和模板的互补性而定），并保持30秒，使引物与单链DNA模板充分退火。退火的目的是让引物找到其互补的序列，并与模板结合。
延伸
将温度升至72°C，并保持30秒，使引物在模板上延伸，合成新的DNA链。这个步骤是PCR循环中合成新DNA的关键步骤。
循环
重复上述变性、退火和延伸步骤25-35次，使扩增的DNA片段大量累积。循环次数取决于所需的扩增量和扩增效率。
末次延伸
在最后一次循环结束后，将反应管置于72°C温育5分钟，以确保所有DNA片段都延伸完整。这一步有助于消除任何未完全延伸的产物。
保存
将扩增产物冷却至4°C保存，以便后续的分析和处理。
示例PCR扩增程序
预变性
94°C，3分钟
循环
94°C，30秒
55°C，30秒
72°C，30秒
重复上述步骤25-35次
末次延伸
72°C，5分钟
保存
4°C保存
这个程序适用于大多数常规的PCR实验，具体参数可以根据实验需求和引物设计进行调整。