pbs缓冲液的配制

时间:2025-02-13 14:38:13 单机游戏

PBS缓冲液是一种常用的磷酸盐缓冲溶液,用于生物学实验中维持pH稳定。以下是几种常见的PBS缓冲液配制方法:

0.05mol/L PBS配制

甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液,称取磷酸氢二钠9.465g和7.099g,加蒸馏水至1000ml。

乙液:0.05mol/L KH2PO4溶液,称取磷酸二氢钾9.07g和6.803g,加蒸馏水至1000ml。

混合:使用时将甲液和乙液按不同比例混合,即可得到所需pH的缓冲液。例如,配制pH=6.8的PBS,可用甲液和乙液各50ml混合。

0.2M PBS配制

Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml水。

NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水。

混合:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4,混合后即可得到0.2M PBS。根据需要,可以进一步稀释得到不同浓度的PBS。

0.01M PBS配制

成分:8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4。

溶解:将上述成分溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L。

灭菌:在15lbf/in²(1034×10^5 Pa)高压下蒸气灭菌至少20分钟,保存于室温或4℃冰箱中。

含0.05%吐温-20的pH7.4 PBS-T配制

成分:磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g、磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g、氯化钠(NaCl)8.0g、氯化钾(KCl)0.2g、吐温-20 0.5mL。

溶解:加水至1000mL,搅拌均匀。

其他:如果用于免疫组化,需要在配置时分别加入100u/ml青霉素和链霉素后再调节pH、定容、灭菌消毒。

通用PBS配制

成分:NaCl 8g、KCl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、KH2PO4 0.24g。

溶解:将上述成分加入800ml去离子水中,搅拌均匀。

pH调节:使用pH计检测溶液的pH值,调整至7.2-7.4。

灭菌:用0.22微米的滤器过滤PBS缓冲液,确保无菌。分装至小瓶中,用无菌技术保存,避免阳光直射和高温。

这些方法提供了几种不同浓度和用途的PBS缓冲液配制方案,可以根据具体实验需求选择合适的配方。