分辨乌龟的性别可以通过以下几种方法：
外形和体型
雌龟通常体型较大，背壳前端较窄，后部较宽且厚，质地粗糙，质片环纹清楚；雄龟体型较小，背壳前部较宽，后部较窄，略呈楔形，且薄，质地细密光滑，质片环纹不清。
雌龟的背甲较短而宽，腹甲平坦且中央无凹陷；雄龟的背甲较长且窄，腹甲中央会有轻微的凹陷，这是为了方便交配时卡住雌龟的背壳。
雌龟的尾巴相对短小且细，而雄龟的尾巴通常更长更粗，尾基部较宽。
颜色
雌龟全身呈泥黄、棕黄、黄褐色；雄龟全身呈黄色、乌黑色。在交配季节，雄乌龟还会有乳白色精液排出。
头部和尾部特征
雌龟眼后颈部斜生有黄色条纹，眼球上下有黄色亮点；雄龟性成熟后，颈部无黄色条纹，头和眼均呈黑色。
雌龟自然伸直时，泄殖孔内缘正达背壳后边，弯曲时，泄殖孔内侧平整，有特殊臭味；雄龟自然伸直时，泄殖孔内缘超出背壳后边一段距离，弯曲时，泄殖孔内侧有长条状突起，无特殊臭味。
行为表现
雄性乌龟往往展现出更强的好斗性和领地占有欲，尤其是在繁殖季节里。求偶行为中，雄性可能会追逐雌性，并尝试通过触碰对方头部或者咬住其颈背来进行求偶。
年龄因素
乌龟一般要到8龄以上性腺才成熟，10龄以上成熟良好。不同物种达到性成熟的年龄也有所区别，例如，陆地箱龟大约需要5到7年才能分辨性别特征，而水生乌龟可能只需要几年时间。
特殊标记
有些品种如红耳龟等，雄性的前爪趾端会长出钩状突起，用以帮助它们在交配期间稳定自己。
通过上述方法，可以较为准确地分辨乌龟的性别。在实际操作中，可以结合多种方法进行综合判断，以提高鉴别的准确性。