液相分离程序基于不同物质在两种不相溶的液体介质——流动相和固定相之间的分配行为来实现分离。其原理可以总结如下：
分配系数
分配系数（K）是衡量样品组分在流动相和固定相之间分配程度的参数。它定义为在平衡状态下，组分在固定相中的浓度（cs）与在流动相中的浓度（cm）的比值，即 K = cs / cm。
分配系数越大，说明该组分在固定相中的滞留时间越长，其保留时间（tR）也就越长。
吸附与溶解
固定相通常是由多孔材料制成，具有较大的比表面积，可以提供足够的吸附位点。样品中的各组分在通过色谱柱时，会与固定相发生吸附作用。
由于样品组分在流动相和固定相中的溶解度不同，它们还会发生溶解作用。这两种作用共同影响了组分的分配行为，从而实现了分离。
洗脱与峰形
在液相色谱中，固定相和流动相之间的相互作用力导致样品中各组分根据其与固定相的亲和力不同而被分离。
通过改变流动相的组成（例如改变溶剂比例或添加洗脱剂），可以使不同组分按照其在固定相中的吸附强度依次被洗脱，形成色谱峰。
液相色谱类型
液-液分配色谱（Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC）：流动相和固定相都是液体，且互不相溶。溶质在两相间进行分配，达到平衡时服从于液相色谱计算公式。
化学键合相色谱（Chemically Bonded Phase Chromatography, CBPC）：固定相通过化学键合于担体表面，分离原理同样基于组分在流动相和固定相中的分配行为。
总结：
液相分离程序利用不同物质在流动相和固定相之间的分配系数差异，通过吸附和溶解作用实现分离。在实际操作中，通过调整流动相的组成和柱子的条件，可以实现对不同组分的有效分离和定量分析。