大切片脱水程序通常包括以下步骤:
福尔马林固定
使用10%福尔马林对标本进行固定,时间约为1.7到2.2小时。
低浓度酒精脱水
70%乙醇脱水3到3.5小时。
80%乙醇脱水2到2.5小时。
高浓度酒精脱水
95%乙醇脱水1.3到1.8小时。
95%乙醇脱水0.8到1.2小时,重复两次。
100%乙醇脱水0.8到1.2小时,重复两次。
透明处理
使用二甲苯进行两次透明处理,每次2道,每道约10分钟。
封片
使用中性树胶对透明后的切片进行封固。
此外,根据不同的实验需求,还可以采用其他脱水方法,例如:
乙醇-丙酮联合脱水:先用乙醇梯度脱水至100%,再用100%丙酮完成最终脱水,同时作为转换剂与包埋剂混溶进行渗透。
直接丙酮梯度脱水至100%,而后与包埋剂混溶进行渗透。
这些步骤旨在彻底去除组织中的水分,确保组织在后续的包埋和切片过程中不会因水分存在而影响结果。建议根据具体的实验要求和样本特性选择合适的脱水程序。