液相冲柱子程序怎么设置

时间:2025-01-24 17:38:53 单机游戏

液相冲柱子的程序设置主要涉及以下步骤:

准备阶段

准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇,冲洗色谱仪器系统,保证仪器系统管路干净。

冲洗色谱柱

反向连接色谱柱:不接检测器,使用水-有机相(90:10~95:5)以0.3~0.6ml/min流速冲洗20~30分钟,目的是冲洗出柱入口端无机杂物与筛板孔杂物。

正向连接色谱柱:不接检测器,继续使用水-有机相(90:10~95:5)以0.3~0.6ml/min流速冲洗20~30分钟,目的是冲洗出柱出口端无机杂物与筛板孔杂物。

连接检测器:开启柱温至30℃~40℃,使用水-有机相(90:10~95:5)以0.3~0.6ml/min流速冲洗4小时以上,目的是充饱和色谱柱,去除柱内空气。

使用不同比例的流动相冲洗:例如,用水-有机相(10:90~5:95)以0.3~0.6ml/min流速冲洗2小时以上,或在120分钟内以水-有机相(10:90~5:95)完成冲洗。

最后冲洗

使用纯水冲洗柱子,每次冲洗50毫升,共冲洗两次,以恢复柱子的原始状态,防止残留的有机溶剂对后续分析造成干扰。

安装柱子

将冲洗过的色谱柱重新插入HPLC系统,并进行系统校准和维护。

建议

根据具体仪器和样品类型调整冲洗参数,如流速、冲洗时间和流动相比例。

在冲洗过程中,定期检查基线是否平稳,确保冲洗效果。

如果柱子受到严重污染,可以增加冲洗时间和更换流动相。

冲洗完成后,确保色谱柱干燥后再进行样品分析,以避免水分对分析结果的影响。